Kim-Shapiro, D.B. and Gladwin, M.T. (2015) Pitfalls in measuring NO bioavailability using NOx. Nitric Oxide 44, 1-2
Tsikas, D. (2015) Circulating and excretory nitrite and nitrate: Their value as measures of nitric oxide synthesis, bioavailability and activity is inherently limited. Nitric Oxide 45C, 1-3
Dans deux lettres à la rédaction de la revue «Nitric Oxide», D.B. Kim-Shapiro et M.T. Gladwin [Winston-Salem, Caroline du Nord; Pittsburgh, Pennsylvanie, USA] puis D.Tsikas [Hanovre, Allemagne] expriment leurs point de vue respectifs sur l’intérêt des diverses méthodes de mesure de la biodisponibilité en oxyde nitrique NO.
▪ Selon Kim-Shapiro et Gladwin:
- La mesure de la concentration plasmatique en NOx, c’est-à-dire la mesure de la somme des concentrations plasmatiques en nitrate NO3- et en nitrite NO2-, ne permet pas d’apprécier fidèlement la synthèse endogène en oxyde nitrique NO, car d’autres facteurs interviennent, tels les apports alimentaires en nitrate, la clearance rénale des ions nitrate, et même des artefacts au laboratoire [While well-appreciated by vascular biologists and chemists, we caution the general scientific community that in most situations the sum of concentrations of nitrite and nitrate do not accurately represent NO production rates, but in fact measure dietary levels of nitrate, renal clearance of nitrate, and artifactual formation or contamination of nitrite in lab and clinical glassware and additives (heparin solutions, vacutainers, etc.)].
- Alors que la mesure de la concentration plasmatique en nitrate NO3- ne permet pas d’apprécier fidèlement l’activité de la NO synthase endothéliale (eNOS), on peut considérer que celle de la concentration plasmatique en nitrite NO2- la reflète plus fidèlement [In 2001, the Kelm lab provided strong evidence that plasma nitrite, but not nitrate, reflects NO production from NOS in humans […]. The Kelm lab […] (found) that about 70% of plasma nitrite is derived from eNOS], à condition, toutefois, de bien éviter toute contamination accidentelle au laboratoire [As mentioned above, nitrite frequently contaminates clinical and laboratory gallsware].
- Les concentrations plasmatiques en nitrate NO3- étant, quantitativement, de 100 à 1000 fois plus importantes que les concentrations plasmatiques en nitrite NO2-, il en résulte qu’il n’est guère justifié de se baser sur la concentration plasmatique en NOx, c’est-à-dire sur la somme des concentrations en NO3- et en NO2-, pour apprécier correctement la synthèse endogène en oxyde nitrique NO.
▪ Selon Tsikas:
- L’activité de la NO synthase endothéliale (eNOS) est nettement plus faible que celle de la NO synthase inductible (iNOS), et même que celle de la NO synthase neuronale (nNOS). Or toutes ces NO synthases interviennent dans la synthèse de l’ion nitrite NO2- [As the eNOS activity is several orders of magnitude lower than that of iNOS and even that of nNOS, and because all NOS isoforms contribute to nitrite…].
- Dans ces conditions, vu nos connaissances actuelles, il n’est guère possible de fixer avec précision la contribution respective de chacune des NO synthases dans la synthèse endogène des ions nitrite et nitrate [The true contribution of the individual NOS isoforms to circulating and excretory nitrite and nitrate will most likely remain unresolved at all times].
- Contrairement à ses collègues américains, l’auteur allemand considère qu’à condition de respecter quatre conditions, la concentration plasmatique en nitrate NO3- peut utilement renseigner le biologiste, ou le clinicien, sur l’importance de la synthèse endogène en nitrate à partir de la L-arginine, sous l’effet des NO synthases. Les quatre conditions sont les suivantes:
- 1) Le sujet doit être à jeun, au moment du contrôle sanguin.
- 2) Le sujet doit, en outre, être soumis à un régime pauvre en nitrate et en nitrite.
- 3) Il doit éviter tout médicament agissant d’une manière ou d’une autre sur la réabsorption rénale des nitrates et des nitrites.
- 4) Le biologiste doit, quant à lui, s’efforcer de minimiser, au laboratoire, les contaminations exogènes par les ions nitrate et nitrite.
[Under certain conditions, such as fasting, low-nitrate and low-nitrite diet, avoidance of drugs affecting renal nitrite and nitrate reabsorption and minimization of sample contamination by exogenous nitrite and nitrate, circulating (and urinary) nitrate can serve as a measure of systemic and whole body NO synthesis form L-arginine, respectively].
- La chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse, qu’utilise l’auteur allemand, fournit des résultats différents de ceux des méthodes basées sur la chimiluminescence. Le rapport concentration plasmatique en nitrate/concentration plasmatique en nitrite lui paraît davantage situé entre 25 et 100 qu’entre 100 et 1000 [The 100- to 1000-fold magnitude reported by Kim-Shapiro and Gladwin is based on data generated mostly by chemiluminescence-based approaches; other analytical methods including gas chromatography-mass spectrometry provide lower nitrate-to-nitrite molar ratios, e.g., 25:1 to 100:1].